猪流行性腹泻不是什么新病,20世纪八十年代就已经在中国发现,但自2010年爆发以来,PED已经成为养猪业面临的重大问题,为整个养猪业带来巨大的经济损失。那么,该如何防控PED,已成为养猪人密切关注的一个话题。下面是小编为大家收集的一些信息:

1 病毒性腹泻的病原学和流行病学

目前PED流行特点和临床症状

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PED是由猪流行性腹泻病毒
引起的一种接触性肠道传染病,其特征为呕吐、腹泻、脱水,发病率和死亡率都较高,且到现在为止还没有好的治疗方法。

1.1 病原
猪腹泻一直是困扰我国乃至全球养猪业的重要疾病。2010年底,大规模、严重猪腹泻在我国南方地区各养殖场暴发,此次大规模的猪腹泻主要表现为哺乳仔猪,特别是1周龄内仔猪的水样腹泻、呕吐、脱水等症状,发病率和死亡率可达80%~100%,后备母猪、经产母猪、公猪及育肥猪等主要表现为一过性水样腹泻。随后,该病迅速扩散至国内各养猪省份。

自2010年爆发以来,PED的流行特点主要为:主要危害是产房的仔猪,3日龄左右的仔猪发病死亡率在90%以上,一次发病持续时间较长,间歇性反复发病。PED没有明显的季节特征,一年四季都发病。腹泻一般从育肥猪开始发病,然后是后备母猪、经产母猪发病,最后传播给产房哺乳仔猪,疫情持续5-8周。

2013年4月,该病首次在北美大陆暴发,并造成了超过800万头仔猪的死亡和严重的经济损失。目前,该病在北美洲、亚洲及欧洲等地区的主要养猪国家均有报道。腹泻是一种症状或症候群,而不是一种单一的疾病。造成腹泻的原因非常复杂,包括传染性和非传染性因素。传染性因素包括病毒、细菌和寄生虫感染,非传染性因素则包括饲料营养、断奶应激、寒冷、潮湿等卫生条件。病毒和细菌是引起腹泻的常见原因,其中又以病毒性腹泻造成的危害相对更普遍、更严重。

“预防为主”是应对一种疾病的基本理念,对于PED的预防,选择对的、有效的疫苗是关键。

研究表明,2010年以来的这一波腹泻为病毒性病原导致的,以猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)
感染为主,超过60%的腹泻样品中可检出PEDV;传染性胃肠炎病毒(transmissible gastraenteritis virus, TGEV)和轮状病毒(porcine rotavirus, PoRV)等腹泻相关病毒也单独或多重混合感染而存在于腹泻猪群中,但两者的检出率相对较低,分别在0%~32%和0%~25%之间。

南京农业大学教授杨倩老师告诉猪兜融媒体记者,采用自家苗对猪群进行免疫存在造成病毒扩散和传染其它病毒的风险,效果不稳定。而弱毒疫苗本身不安全,且容易引起病毒变异,有些弱毒疫苗在国内外是禁止使用的,不建议采用。

此外,一种新的与腹泻相关的病毒——猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus, PDCoV)从中国大陆多个省份腹泻猪群中被检出,检出率在6.51%~31%,是检出率仅次于PEDV的腹泻病原。

她大力提倡灭活病毒、亚单位疫苗和抗原递送载体。她指出,全灭活病毒安全性好、抗原组分齐全、不会出现毒力返强和变异的危险,全灭活病毒通过各种免疫途径都能诱导很强的体液免疫和细胞免疫,尤其是通过黏膜免疫途径全灭活病毒科诱导交叉保护作用,在大范围流行中尤其重要。此外,母源抗体对灭活苗免疫效果几乎没有影响。全灭活病毒需要免疫增强剂,比如微胶囊、减毒细菌和病毒等各种递送系统。市场上目前出现了以益生菌作为载体的PED功能性微生态制剂。这种新型疫苗在临床上取得了较显着的效果。

1.2 流行特点
由于流行病原谱从原来的PEDV、TGEV和轮状病毒为主要病原转变为由PEDV和PDCoV为主要病原,导致此次腹泻流行情况与以往的流行病学和传统认识存在较大差异。针对PEDV的研究也表明,当前流行毒株的遗传和抗原性等均发生了变异。进化树分析表明,当前主要流行PEDV毒株与主要疫苗毒株CV777处于不同的进化分支。

一、疫苗和病毒不匹配。PED是猪腹泻的主要病因,但不是全部,像猪伪狂犬病、大肠杆菌感染、新型肠道病毒、魏氏梭菌感染、母乳中含有呕吐毒素、母猪泌乳障碍和冷应激等均可引起腹泻,这是PED疫苗无法控制的。即使是PED,也可能存在感染的病原毒株与疫苗不匹配情况。这些问题更多的与疾病诊断是否准确相关。

2010年后鉴定的PEDV中国毒株的S基因表现出了新的变异特征,与CV777毒株S基因核苷酸的同源性仅为89%~92%;而与2013年以来鉴定的美国PEDV毒株S基因氨基酸的同源性为93%~99%。进化树分析显示,2010年后的毒株与之前的毒株全基因组及S基因出现明显的分支。主要突变存在于S1基因区域及抗原位点COE(CO-26K equivalent)中的中和表位区域。CV777强毒株在S蛋白549及594位点其氨基酸为苏氨酸和甘氨酸,而2010年后毒株在这两个位点上的氨基酸均为丝氨酸,2002~2009年毒株在549位点为精氨酸或丝氨酸,594位点为丝氨酸。

二、对于多血清型的病原,疫苗只针对单一的血清型很难奏效。

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三、免疫抑制性疾病导致免疫失败。在诸如蓝耳病这样的疫病存在时,免疫系统的功能受到影响,疫苗的效果也会打折扣。

新现的PDCoV属于冠状病毒科中一个新的属——丁型冠状病毒属(genus deltacoronavirus),是唯一一种感染非禽类的丁型冠状病毒。该病毒最早是香港学者从猪粪便拭子样品中检测到。2014年美国学者从暴发腹泻的猪群样品中检出并成功分离,新生猪和新生商品仔猪攻毒试验均表明该病毒可以导致新生仔猪PED、TGE样腹泻。临床调查结果也证实了PDCoV可引起各阶段猪只腹泻,但主要以新生哺乳仔猪腹泻为主;该病毒可单独或与PEDV混合感染而存在。

四、疫苗的免疫效果的临床表现,取决于肠道产生的IgA抗体水平与环境载毒量相互作用关系的结果,而IgA抗体水平主要取决于群体抗体高度与群体抗体均匀度。如果猪场环境载毒量过高,即使免疫疫苗抗体水平再高,也无法抵御野毒的攻击,从而表现发病状态。哪怕使用了变异毒株的猪流行性腹泻疫苗,只是发病率低一些罢了。

1.3 传染流行特点

五、疫苗生产质量不达标,疫苗在运输过程中没有按要求冷链,疫苗的储存条件不当,疫苗在常温下放置过长等一系列客观因素会影响到疫苗效果。

猪病毒性腹泻是独立的猪急性接触性肠道传染病,发病猪和带毒猪是主要的传染源,感染后的康复猪也可作为中间传播宿主进行病毒传播;同时,被病毒污染的周围环境,如运输车辆、饲料、饮水、饲养员的衣服和鞋、用具等都可散播传染。腹泻病毒主要经消化道传播,粪——口传播是主要的传播途径,但有人报道还可以通过乳汁、呼吸道等途径传播。研究表明,腹泻或带毒母猪在产后可通过粪便排毒,且排毒周期较长,可长达1个月。

六、免疫人员的专业水平或经验不足,使用疫苗不规范:免疫方法不正确、免疫剂量不正确、免疫途径不正确等,均会导致免疫失败。

目前,我国各年龄阶段的猪只都能感染发病,其中哺乳仔猪、保育猪和育肥猪是易感染猪群。新生哺乳仔猪与哺乳母猪在同一个环境下生活,非常容易接触到病毒,且仔猪免疫系统发育不完善,无主动免疫保护,如果母乳中无足够的保护性抗体或仔猪无法吸吮到母乳则非常容易发病。在临床上,较容易观察到新生仔猪,特别是1周龄内仔猪发病率和死亡率非常高;随着仔猪日龄增加,其抵抗力也增强,发病率和死亡率呈下降趋势。另外,有报道显示感染了其他病原,如猪圆环病毒2型、猪蓝耳病病毒等会加重感染PEDV后的症状和病变。

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腹泻疫苗及免疫机理截止2018年1月,国内共有22家企业获得了29个腹泻疫苗批准文号。其中有流行性腹泻、传染性胃肠炎病毒二联灭活疫苗,猪流行性腹泻、传染性胃肠炎病毒二联弱毒苗,猪流行性腹泻、传染性胃肠炎和轮状病毒三联灭活苗及猪流行性腹泻、传染性胃肠炎和轮状病毒三联弱毒苗。

2.1 灭活疫苗
早期国内的灭活苗生产采用给仔猪口服强毒,待仔猪出现水样腹泻时剖杀取肠内容物和黏膜,加入甲醛灭活后用氢氧化铝佐剂制备成乳剂。自1988年通过添加胰酶的方法在Vero细胞上成功分离出PEDV后,多种二联及三联疫苗研制成功并上市。以低代次PEDV CV777与TGEV华毒株制备的TGE-PED二联灭活苗和PED-TGE-RoV三联灭活苗使用的时间长,推广面积大。最近两年有基于中国PEDV新毒株ZJ08株以及2010年后变异毒株AJ1102株研制的PED-TGE二联灭活苗上市和使用。至此,在生产实践中有基于CV777毒株和新毒株(ZJ08和AJ1102)PEDV疫苗的选择,且新毒株疫苗的使用比例呈现增加的趋势。

灭活苗以其安全性高、易于运输和保存的特点,在动物疫病防控方面发挥了非常重要的作用。后海穴或颈部肌肉注射是灭活苗的免疫途径,机体血液中产生的中和抗体类型主要为IgG,可保护病毒的全身感染。仔猪出生后通过吸吮母乳获得免疫抗体,主要为IgG,也有少量的IgA。抗体通过肠上皮进入血液循环,从而被动获得抵抗全身感染的免疫力。此外,灭活苗的单次免疫剂量大,通常每次需注射107.0TCID50/mL,且需要免疫2次及以上才能刺激产生较高水平的中和抗体。

但随着PEDV在体外细胞培养技术的不断改进,抗原含量的瓶颈得到了解决。目前,市售活苗中的抗原含量达到了107.0TCID50/mL,最近上市的AJ1102株抗原含量更是高达107.5TCID50/mL。

2.2 弱毒疫苗
当前已有9家企业生产的3种PED商品化弱毒疫苗,分别为:TGE-PED-RoV(弱毒华毒株+弱毒CV777株+NX株)三联弱毒苗,TGE-PED(弱毒WH-1株+弱毒AJ1102株)二联弱毒疫苗和TGE-PED(HB08株+ZJ08株)二联弱毒疫苗。

PEDV、TGEV和RoV都是经消化道感染,具有非常明显的肠组织嗜性。对肠绒毛上皮细胞的侵染,引起肠绒毛上皮细胞的萎缩脱落,从而造成感染猪只的消化功能紊乱、酸中毒和脱水。因此,在肠腔内阻断腹泻病毒感染是最直接和有效的方法。在防疫中起主要作用的抗体是循环抗体和分泌型黏膜抗体。IgG的主要作用是用来抵御全身感染,而sIgA主要用来抵御黏膜感染。

IgG的分子量较大,不容易穿过肠壁进入肠腔,它们对胃酸和消化酶的抵抗力较差。sIgA也叫分泌抗体,分子量较小,它们在黏膜免疫中起主要作用,可以抵御胃酸和消化酶的消化,并且与肠黏膜有亲和作用,所以IgA在肠道中起重要的作用。研究表明,母源sIgA的水平与仔猪对PEDV感染抵抗力有关,而血液中的中和抗体与其对新生仔猪的保护作用没有相关性。因此,对于养殖场如何防控PEDV感染,除严格的生物安全外,首先要刺激动物机体产生特异性的高效价的sIgA抗体,是疫苗免疫的关键。